Schizosaccharomyces pombe

Protocoles

Transformation rapide de levures

  1. Culture sur plate 3-4 jours à 30ºC
  2. Resuspendre une colonie dans 70 µL de PLATE (avec TRIS à pH 4.9 ou 7.5)
  3. Ajouter 10 µL de plasmid DNA (1.0 µg dans H2O stérile)
  4. Ajouter 10 µL de carrier DNA (tRNA / 100 µg)
  5. Ajouter 10 µL d’ H2O stérile (volume final = 100 µL)
  6. Incuber pour 1 heure à 30ºC (sans agitation)
  7. Heat shock pour 15 minutes à 42ºC
  8. Refroidir à température pièce (et attendre 2-4 heure pour exprimer résistance, si nécessaire)
  9. Plater
Protocole tiré de : A simple and efficient procedure for transformation of Schizosaccharomyces pombe.
Morita T, Takegawa K.; Yeast. 2004 Jun;21(8):613-7.; PMID: 15197727 [PubMed - in process]